DNA怎么提取?DNA是生命信息的记录。关于DNA怎么提取以及DNA怎么提取,DNA怎么提取鉴定,怎么样提取dna,怎么样提取DNA,怎样提取dna的方法等问题,美篇养生将为你整理以下的日常知识:
DNA怎么提取
DNA是生命信息的记录。
每个人的DNA都是不一样的,作为一种试验,可以进行DNA提取,比如说准备草莓,通过一定一系列的实验的内容,就能够把草莓的DNA提取出来,这时候需要准备实验的器材,比较常见的就是医用酒精,另外还需要一些工具,需要各种容器,下面我们来了解一下这方面的内容。
dna提取原理
这坨白色的悬浮物就是DNA了,不过这只是十分粗略的提取,产物也有不少杂质。
这个小实验提取的是草莓的DNA,理论上说,其他很多食材也一样能进行DNA提取,不过草莓还是有自己的优势的:它很柔软容易碾碎,而且我们所吃的草莓又是多倍体,它们有八份拷贝的基因,DNA的分量也很足~需要准备的材料:酒精(医用酒精就可以)、水、盐、洗洁精、草莓、可以密封的保鲜袋、滤网、量杯、各种容器(酒精需要事先放到冰箱里冰镇)首先,我们需要配制一个“提取液”,你可以采用这样的配方:45毫升纯净水、5毫升洗洁精、1/4勺盐。
这里面加入表面活性剂是为了破坏细胞膜结构,让DNA分子更好地释放出来接下来,把草莓放进保鲜袋里,加上上述提取液:
排除多余空气,封好口,然后充分挤压草莓,让它完全变成一坨“草莓糊”。
接下来,用滤网把“草莓糊”中的汁液过滤到杯子里:
取一些“冰镇酒精”(图中是用了1/2杯),顺着杯壁缓缓倒入提取液中(不要搅拌)。
不要让酒精和提取液完全混合,它们会浮在上层
接下来,就可以看到DNA析出了:
DNA是极性很强的物质,它们是水溶性的,而在极性相对较弱的乙醇(或者异丙醇)中则会溶解度降低很多并析出。
这个还是很粗略的提取,不过亲眼看到DNA也是挺有意思的。
在生物课上可能也会讲到这个经典的实验~
DNA怎么提取
dna提取的几种方法
(1).浓盐法
利用rnp和dnp在电解溶液中溶解度不同,将二者分离,常用的方法是用1m
氯
纳提取化钠抽提,得到的dnp粘液与含有少量辛醇的
氯仿一起摇荡,使乳化,再离心除去蛋白质,此时蛋白质凝胶停留在水相及氯仿相中间,而dna位于上层水相中,用2倍体积95%乙醇可将dna
钠盐沉淀出来.
也可用0.15
mnacl液反复洗涤细胞破碎液除去rnp,再以1mnacl提取脱氧核糖蛋白,再按氯仿---异醇法除去蛋白.
两种方法比较,后种方法使核酸降解可能少一些.
以稀盐酸溶液提取dna
时,加入适量去污剂,如sds可有助于蛋白质与dna
的分离。
在提取过程中为抑制组织中的dnase对dna
的降解作用,在氯化钠溶液中加入柠檬酸钠作为金属离子的烙合剂.通常用.15mnacl,0.015m柠檬钠,并称ssc溶液,提取dna.
(2).阴离子去污剂法:
用sds或二甲苯酸钠等去污剂使蛋白质变性,可以直接从生物材料中提取dna
.由于细胞中dna与蛋白质之间常借静电引力或配位键结合,因为阴离子去污剂能够破坏这种价键,所以常用阴离子去污剂提取dna.
(3).苯酚抽提法:
苯酚作为蛋白变性剂,同时抑制了dnase的降解作用.用苯酚处理匀浆液时,由于蛋白与dna
联结键已断,蛋白分子表面又含有很多极性基团与苯酚相似相溶。
蛋白分子溶于酚相,而dna溶于水相。
离心分层后取出水层,多次重复操作,再合并含dna
的水相,利用核酸不溶于醇的性质,用乙醇沉淀dna
。
此时dna是十分粘稠的物质,可用玻璃漫漫绕成一团,取出。
此法的特点是使提取的dna保持天然状态
.
(
4).水抽提法:
利用核酸溶解于水的性质,将组织细胞破碎后,用低盐溶液除去rna,然后将沉淀溶于水中,使dna充分溶解于水中,离心后收集上清液.在上清中加入固体氯化钠调节至2.6m.加入2倍体积95%乙醇,立即用搅拌法搅出.然后分别用66%
80%和95%乙醇以及丙铜洗涤,最后在空气中干燥,既得dna样品.此法提取的dna中蛋白质含量较高,故一般不用.为除蛋白可将此法加以改良,在提取过程中加入sds.
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